Muzium pembunuhan Tuol Sleng terletak di Phnom Penh, Kemboja. Asalnya, muzium ini ialah sebuah sekolah menengah, yang ditukar menjadi penjara sewaktu komunis bertakhta di Kemboja pada tahun 1975-1979.

Aspirasi Khmer Rouge di bawah pimpinan mendiang Pol Pot ialah untuk menubuhkan negara komunis, dan empat bulan selepas Khmer Rouge memenangi perang sivil pada tahun 1975, penjara Tuol Sleng digunakan untuk memenjara, menyeksa dan menjalankan hukuman bunuh ke atas rakyat Kemboja dan rakyat asing yang dianggap bekerjasama dengan negara asing untuk menakluk Kemboja.

Dari tahun 1975 – 1979, dianggarkan 17,000 orang telah ditahan di penjara Tuol Sleng (juga dikenali sebagai S-21). Ada yang menganggarkan jumlahnya ialah 20,000 orang, tetapi jumlah sebenar tidak diketahui. Dari 17,000 orang ini, hanya 7 orang diketahui terselamat, dan hingga ke hari ini, hanya tiga orang dari angka yang terselamat ini masih hidup.

Cerita dari mangsa yang terselamat bukanlah cerita yang enak didengar. Kebanyakan yang ditangkap ialah individu berpelajaran tinggi dan bekas pegawai-pegawai kerajaan, serta keluarga mereka. Gambar-gambar mereka pula ditangkap oleh seorang jurugambar yang pada masa itu seorang remaja yang benama Nhem En. Rejim Khmer akan memaksa mereka yang ditangkap untuk mengakui yang mereka ialah ejen CIA atau KGB atau Vietnam,  dengan menyeksa mereka sehingga menandatangani pengakuan.

Selepas mendapat pengakuan, banduan tadi akan dibunuh. Pihak Khmer tiada belas kasihan kepada wanita, kanak-kanak atau bayi: kesemuanya dibunuh dan diseksa dengan kejam. Banduan dipakaikan rantai kaki, dipaksa hidup dalam keadaan sempit, dipaksa makan najis atau minum air kencing sebagai kaedah penyeksaan, dibelasah dengan teruk dan adakalanya dipukul dengan besi, parang atau apa jua senjata sampai mati. Ada masanya mereka dipaksa menjadi subjek ujian perubatan untuk pembedahan yang menyebabkan kematian mereka.

Tanah di sekeliling penjara Tuol Sleng menjadi sesak dan tidak lagi dapat menampung mayat-mayat, jadi pihak penjara kemudiannya membawa banduan-banduan ke padang penghapusan Choeung Ek, di mana banduan tadi dipukul dengan besi atau senjata beramai-ramai, kemudiannya mayat mereka ditimbus di situ.